Главная страница Карта сайта Контактная информация





     


Главная » О лаборатории »

Группа мономолекулярной флюоресцентной спектроскопии

Задача группы

Разработка и применение новых подходов к исследованию структурных перестроек, происходящих в нуклеосоме в процессе транскрипции хроматина, на основе методов флуоресцентного анализа одиночных молекул и их комплексов.

Введение

Одним из приоритетов проекта является разработка новых экспериментальных подходов и методологий, которые могли бы найти применение не только для выполнения настоящего проекта, но и были важны для развития последующих прикладных направлений  и ОКР. В этой связи особое внимание уделялось методам, позволяющим исследовать структуру и динамику отдельных комплексов макромолекул. Многообещающей технологией, созданной в рамках проекта, является метод FRET (перенос энергии между флуорофорами, зависимый от расстояния между макромолекулами и/или их компонентами) на уровне отдельных макромолекулярных комплексов (FRET единичных частиц, FRETеч). 

В течение первого года (2011) выполнения работ по проекту были преодолены технические проблемы, связанные с инсталляцией новых модулей к флуоресцентному микроскопу, позволяющих проводить исследования spFRET, осуществлена конструкция специальных сборных кювет, оптимизированы конструкции экспериментальных установок для таких измерений и проведением измерений FRET от единичных комплексов. Проведен поиск и пути решения задачи регистрации  FRET от единичных комплексов с использованием техники полного внутреннего отражения. В 2012 были отработаны экспериментальные методики детекции нуклеосом, иммобилизованных на подложки, и  в растворе.

Также создана коллекция образцов нуклеосом, меченных двумя парами флуорофоров Су3/Су5 в различных областях нуклеосом  – проксимальной и дистальной. Методика FRETеч позволила нам проводить исследование динамики транскрипции хроматина в реальном времени.


Смотрите в этом разделе:


версия для печати